ПЦР — анализ — Медицинский журнал
Медицина как призвание

ПЦР — анализ

пцр-анализ

пцр-анализ

ПЦР — диагностика — это один из наиболее современных высокотехнологичных методов исследования, который широко применяется в диагностике инфекционных заболеваний, позволяя обнаруживать даже единичные микроорганизмы в организме человека. В современной клинической практике ДНК-диагностика объединяет несколько методов исследования, самым распространенным из которых является метод ПЦР (полимеразной цепной реакции).

Первоначально сам принцип метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) был разработан Кэри Мюллисом в 1983 г. Открытие полимеразной цепной реакции стало одним из паиболее выдающихся событий в области молекулярной биологии в последней четверти ХХ века, и за разработку ПЦР-анализа Кэрри Мюллис уже в 1993 г. был удостоен Нобелевской премии в области химии.

Анализ методом ПЦР основан на обнаружении в материале исследования небольшого фрагмента ДНК возбудителя той инфекции, которую подозревает врач. Говоря “небольшой фрагмент ДНК” мы подразумеваем “обрывок” нуклеиновой цепочки длиной всего в несколько сотен пар нуклеотидов — тогда как любая, самая простая ДН К включает в себя не менее нескольких тысяч оснований.

Такой подход является наиболее эффективным при диагностике внутриклеточных паразитов и медленно растущих микроорганизмов, требующих сложных условий культивирования для ранее использовавшихся способов диагностики.

Благодаря высокой точности определения появилась возможность поиска возбудителей болезней практически в любом биологическом материале.

Сегодня методу ПЦР-анализа подвергаются:

  • соскоб эпителиальных клеток (соскоб из уретры у мужчин и у женщин, соскоб из вертикального канала) кровь, плазлма, сыворотка крови, биологические жидкости (сок простаты, плевральная, спинномозговая, околоплодная, суставная жидкости, слюна)
  • моча
  • мокрота
  • биопаты  желудка и двенадцатиперстной кишки
  • слизь и другие биологические выделения.

Достоинства  метода ПЦР:

  • Высокая специфичность за счет того, что искомые кусочки генетического материала имеют уникальные последовательности ДНК
  • Высокая чувствительность за счет многократного размножения исходного материал
  • Универсальность — при правильном подходе может быть проанализирован любой материал
  • Быстрое получение результата (в отличие от бактериологических методов, где результата приходится ждать довольно долго)
  • Возможность одновременной  диагностики  многих возбудителей (анаэробов и аэробов, вирусов, бактерий и грибов)
  • Для некоторых микроорганизмов ПЦP является практически единственным методом диагностики (например, для Mycoplasma genitalium)

ПЦР — анализ может быть качественный и количественный — т.е. может просто свидетельствовать о наличии того или иного возбудителя, а может и давать информацию о количественном содержании возбудителя в тех или иных биологических материалах.

Как правильно подготовится к анализу ПЦР:

Достоверность результатов лабораторной диагностики ПЦР зависит не только от опыта и профессионализма врача-лаборанта, возможностей данной лаборатории, но и от того, соблюдал ли пациент рекомендации врача, насколько правильной была его подготовка к проведению анализа. При сдаче анализа методом ПЦР врачи рекомендуют соблюдать следующие правила

  • За сутки до проведения анализа не жить половой жизнью
  • Сдача ПЦP анализа крови проводится натощак, т.е.  необходимо ничего не есть, не пить и не жевать жвачку
  • Для ПЦР-анализа мочи используется первая утренняя порция, собранная в чистый, стерильный контейнер

ПЦР-анализы:

В устоявшейся клинической практике ПЦР-анализы обычно сдают “блоками” на определенные группы возбудителей.

Например: ПЦР — диагностика инфекций, передаваемых половым путем, где одновременно выявляются:

  • бактериальные инфекции Chlamydia trachomatis (хламидия), Mycoplasma hominis (микоплазма человека), Gardnerella vaginalis (гарднерелла), Mycoplasma genitalium (микоплазма генитальная), Vreaplasma parvum (уреаплазма парвум), Ureaplasma urealyticum (уреаплазма уреалитикум), Neisscria gonorrhoeae (гонококки)
  • вирусные инфекции. НPV (Human Papillomavirus, папиллома вирус человека) типы 16,31,33,35Н,52,58,67; типы )8,45,39,59; тип 6,11; тип 26, 51;
  • инфекции, вызванные простейшими: Trichomonas vsgina1is — трихомонад
  • грибковые инфекции: Candida albicans — кандида.

ПЦР-диагностика бактериальной инфекций:

  • бруцеллы. вызывает заболевания дыхательных путей, мочевыделительной системы, органов половой сферы и опорно-двигательного аппарата
  •  гемофилы: к настоящему времени известно 9 видов гемофил, вызывающих инфекции у человека.

Haemophilus ducrei вызывает  инфекции, предающиеся половым путем (симптомы — обильные, водянистые, периодически гноевидные выделения с неприятным запахом из половых путей, дизурические явления) Haemophilus species вызывает заболевания дыхательных путей (симптомы — поражение дыхательных путей, кашель с мокротой; повышение температуры тела; слабость, недомогание);

  • кампилобактерии: Campulobacter species вызывает воспалительные заболевания половых органов у женщин и мужчин со следующими симптомами: дизуроческие явления (небольшие рези при мочеиспускании, слизисто-гнойные выделения из половых путей; тянущеи боли внизу живота)
  • листерии: Ltsteria monocytogenes вызывает заболевания отделов малого таза, мочевыводящих путей, суставов, органов дыхания со следующими симптольами: слизисто-гнойные выделения из половых путей, боли внизу живота, отек суставов, боли в суставах; кашель с мокротой, дизурические явления
  • микобактерии туберкулеза: развитие туберкулезной инфекции вызывают 4 вида микобактсрий: Mycobacterium tuberculosis; Mycobacterium bovis; Mycobacterium africanum; Mycobactcnum microti.

Во всем мире каждый год регистрируют около 8 миллионов новых случаев этого тяжелого заболевания, около 3 миллионов человек каждый год умирает от туберкулеза.

  • Микаплазмы: внутриклеточные микробы, очень широко распространены в природе. Уреаплазмы — это особая и наиболее «популярная» разновидность патогенных для человека микоплазм. На их долю приходится большая часть хронических микоплазмозов человека
  • Кроме уреаплазм известно еще несколько видов безусловно патогенных для человека видов: Mycoplasma species, Mycoplasma pneumoma, Mycoplasma hominis, Mycoplasma gemtalium, Ureaplasma urealyticum, Ureaplasma parvum. Наиболее часто патогенными видами микоплазм поражаются: мочеполовые органы: пиелонефрит, уретрит, нарушение овуляции и сперматогенеза;
  • сердечно-сосудистая система: артериальная гипотензия (гипотония), кардит, перикардит;
  • органы пищеварения: невирусный гепатит, гастрит, холецистит, кишечные дисфункции (упорные диареи);
  • респираторные органы: ОРЗ, хронический ринит, атипичная пневмония (не путать с азиатской «атипической пневмонией»!);
  • суставы: ревматоидный артрит, подагра;
  •  центральная и периферическая нервная система: неврастении, невралгии, локальные болевые синдромы и, по некоторым данным, демиелинизирующие заболевания;
  •  кожа и слизистые оболочки: повышенная ломкость и проницаемость капилляров, вульгарные угри, простой герпес (микоплазмы принимают участие в транспорте вируса);
  • нейссерии: для человека патогенными являются Netsseua gonorrhoeae и Neisscna meningitis.

ПЦР-диагностика вирусных гепатитов, герпеса и других вирусных инфекцией:

•        вирус Эпштейн — Барр (из семейства герпесвирусов), вызывает легкое заболевания удетей и инфекционный мононуклеоз у неиммунизированных подростков и взрослых, является вездесущей вирусной инфекцией и присутствует практически у 100% популяции людей.

Чаще всего заражение им происходит в раннем детском и в юношеском возрасте, поэтому более 90% взрослых уже перенесли эту инфекцию в той или иной форме и имеют антитела к вирусу Эпштейн — Барр;

  • герпес: Самая распространенная вирусная инфекция. Около 90% людей на земле инфицированы герпесом.

Только у 5% инфицированных проявляются симптомы болезни, у остальных она протекает без клинических проявлений. Наиболее часто вирус поражает: глаза (конъюнктивит, кератит), слизистую губ, слизистые оболочки половых органов, центральную нервную систему (энцефалит, менингит). У беременных женщин вирус может вызвать патологию беременности, самопроизвольные аборты, преждевременные роды;

  • вирусных гепатиты — это гепатиты, вызванные вирусной фекцией: A, B, C, G.
  • цитомегаловирус: это целая группа вирусов, которые могут присутствовать в любой жидкости организма человека: кровь, моча, слюна, сперма, секрет влагалища, грудное молоко и т.д. Цитомегаловирус во многом схож с вирусом простого герпеса, поэтому его относят к разновидности герпетических инфекций. Цитомегаловирус как болезнь может развиться в результате ослабления защитных реакций организма: на фоне сильных стрессов, гриппа, обострения хронических заболеваний, осложнений беременности;
  • другие вирусные инфекции ВИЧ, вирус Варицелла-Зостер, энтеровирус.

ПЦР-диагностика острых кишечных и респираторных инфекций:

  • респираторные инфекции: аденовирусы, грипп А и В, на РНК вируса гриппа А, анализ на свиной грипп
  • вирусные кишечные инфекции: астровирус, норовирусы 1 и 2 типов, ротавирусы А и С, саповирус
  • бактериальные кишечные инфекции Е. Coli (энтеротоксигенные штаммы), Shtgella (геморрагические штаммы), Salmonella typhi, Salmonella species, Yersinia enterocolitica, Yersmta pseudotuberculosis

Рекомендуем прочесть: Биохимический анализ
8653323

ОТЗЫВЫ
avatar
jeni, 16 октября в 08:41

Как подготовиться к пцр диагностике?

avatar
prizvanie_su, 18 октября в 10:14

читайте, пожалуйста в этой статье — все написано.

avatar
Матвей, 2 января в 06:36

Сдавал анализ на гонорею в Москве сказали все в норме, дали справку, но норма там не указана. Написали просто «результат-отрицательный».

ДОБАВИТЬ ОТЗЫВ